Question

基因工程相關。2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發下發出熒光，這樣借助GFP發出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內部的移動情況，幫助推斷蛋白質的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖，據圖回答：

注：圖中通過過程①、②形成重組質粒，需要限制性內切酶切取目的基因、切割質粒。限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G^↓GATCC—，限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點是—^↓GATC—。在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點。

  （1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來        ，理由是：                                          。

  （2）過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多的方法是              。

  （3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是               。獲得的轉基因克隆豬，可以解決的醫學難題是，可以避免           。

  （4）目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是：          （用數字表示）。①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達出藍色熒光蛋白。

 

Answer 1

【答案】

（1）可以連接   因為由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的  （2）顯微注射技術  （3）為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因    發生免疫排斥反應   （4）②①③④ 

【解析】

試題分析： 限制酶識別特定的核苷酸序列，并在特定的切割位點切割，產生粘性末端。限制酶Ⅰ和Ⅱ切割后產生的粘性末端相同，即均產生GATC序列，因此可以用DNA連接酶連接起來，目的基因導入動物細胞最常用、最有效的方法是顯微注射法。標記基因可以檢測目的基因是否導入受體細胞。用轉基因克隆豬進行器官移植等醫學難題，可以避免入情入理免疫排斥反應。蛋白質工程的基本途徑是：從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列→相應基因的修飾改造或人工合成→相應的表達。

考點：本題考查基因工程、蛋白質工程的相關知識，意在考查學生理解所學知識的要點；能運用所學知識，分析問題的能力及從圖中獲取相關的信息的能力。