Question

【題目】毒死蜱（C9H11C13NO3PS）是一種有機磷殺蟲劑，長期使用將導致土壤中農藥殘留嚴重。某研究小組從長期施藥的韭菜溫室土壤（偏酸性）里分離出能降解毒死蜱的木霉，并對其降解特性進行初步研究。請回答：

（1）用于分離木霉菌種的培養基屬于___培養基。配制此培養基時，應加入___作為唯一碳源。

（2）制備培養基的操作順序是_____________________（用下列字母和箭頭排序）

a．倒平板 b．計算 c．熔化 d．稱量 e．滅菌

（3）接種前，將培養基在適宜溫度下放置適當的時間，觀察培養基______，以確定培養基是否被污染。

（4）為了統計木霉活菌的數目，應采用的方法是________，首先需將水樣進行適當稀釋，例如取水樣 1 mL加入無菌水99mL 制備稀釋倍數為102的稀釋液，并照此依次制備更高倍數的稀釋液。整個過程中，都要在________操作。

Answer 1

【答案】選擇 毒死蜱 b→d→c→e→a 是否產生菌落 稀釋涂布平板法 酒精燈火焰附近

【解析】

微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

其中，稀釋涂布平板法可用于計數活菌。

（1）要分離出能降解毒死蜱的木霉，需要以毒死蜱作為唯一碳源培養基，在該培養基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存，其它微生物都不能生存，因此該培養基屬于選擇培養基。

（2）制備培養基的操作順序是計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板，即b→d→c→e→a。

（3）接種前，將培養基在適宜溫度下放置適當的時間，觀察培養基是否產生菌落，以確定培養基是否被污染。

（4）用稀釋涂布平板法進行對微生物計數時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品大約含有多少活菌，首先需將水樣進行適當稀釋，例如取水樣 1 mL加入無菌水99mL 制備稀釋倍數為102的稀釋液，并照此依次制備更高倍數的稀釋液。為了防止雜菌污染，整個操作過程應進行無菌操作，所以應該在酒精燈火焰附近進行。