Question

(12 分)世界苦蕎在中國，中國苦蕎在涼山。 苦蕎富含黃酮類化合物等營養物質，在降血糖、降血脂等方面功效顯著。查爾酮合成酶（CHS）是黃酮類化合物合成的關鍵酶，下圖為將修飾后的 CHS基因導入苦蕎，培育高產黃酮苦蕎品系示意圖。

（1）過程①中能切開質粒的酶是__________。它能在質粒特定的部位切割的原因是____________________。

（2）圖中常用的是__________培養基。接種前，用滅菌后未接種的培養基培養一段時間，觀察是否形成菌落，目的是__________________________________________________。

（3）過程②、③分別是__________和__________。苦蕎體細胞能培養成植株的根本原因是___________________。

（4）為探究激素對于過程誘導愈傷組織的影響，某研究小組在培養基中加入6-BA和2,4─D，滅

菌后分別接種，在適宜條件下培養一段時間后，統計愈傷組織的誘導率，實驗結果如下表：

該實驗的因變量是____________，誘導的最佳組合是_____________________________________。

（5）判斷轉基因苦蕎培育是否成功，可比較轉基因苦蕎與普通苦蕎的________________含量，也可測定細胞中CHS含量。用凝膠色譜法分離CHS時，CHS最先從色譜柱中洗脫出來，說明CHS相對分子質量較______________。

Answer 1

(12分，除標注外每空1分)

（1）限制性核酸內切酶 能識別特定的核苷酸序列并在特定的切點上切割 DNA 分子 (2 分)

（2）MS 判斷培養基滅菌是否徹底

（3）脫(去)分化 再分化 植物細胞的全能性其細胞中含有發育成完整個體所必需的全部基因

（4）誘導率 0.1mgL -1 6-BA 和 4mgL-12,4-D

（5）黃酮類化合物 大

【解析】

試題分析：（1）質粒是環狀的DNA，能將質粒切開的應是限制性核酸內切酶。它能在質粒特定的部位切割的是因為其能在識別特定的核苷酸序列并在特定的切點上切割 DNA 分子。

（2）植物培養基通常是MS固體培養基。接種前，用滅菌后未接種的培養基培養一段時間，觀察是否形成菌落，目的是判斷培養基滅菌是否徹底。如果有菌落形成說明滅菌不徹底。

（3）過程②是形成愈傷組織的脫分化，③由愈傷組織培養成幼苗的再分化過程。體細胞能培養成完整植株的根本原因是植物細胞的全能性，其細胞中含有發育成完整個體所必需的全部基因。

（4）由表可知該實驗的自變量是濃度和激素種類，因變量是誘導率。最高的誘導率組合是最佳的誘導組合應是0.1mgL -1 6-BA 和 4mgL-12,4-D。

（5）高產的轉基因苦蕎培育成功后黃酮類化合物含量較高，故應比較轉基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量。因為查爾酮合成酶（CHS）是黃酮類化合物合成的關鍵酶，所以也可以測定查爾酮合成酶的含量。凝膠色譜法分離蛋白質時，最先洗脫出來的是分子質量大的，說明CHS相對分子質量較大。

考點：本題考查植物組織培養相關知識，意在考察考生對知識點的識記理解掌握程度和對數據分析能力。