下列關于基因工程的說法正確的是（ ）
A．限制性核酸內切酶能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切割點上將相應堿基之間的鍵斷開，從而使DNA分子切斷
B．DNA連接酶、限制性內切酶及載體是構建重組質粒必需的工具酶
C．下面是兩種限制性核酸內切酶所識別的DNA分子序列和剪切位點圖（↓表示剪切點、切出的斷面為黏性末端）：限制酶1：—↓GATC— ，限制酶2：—GGATC↓C— ，這兩種限制酶剪出的黏性末端是不相同的
D．在人工合成目的基因的過程中，根據蛋白質中氨基酸序列合成的目的基因堿基序列及控制的性狀與生物體內原有的基因及性狀是相同的。
閱讀快車系列答案科目：高中生物 來源：上海市十三校2012屆高三第二次聯考生物試題 題型：071
回答下列關于基因工程的相關問題。
質粒是基因工程中的一種常用的工具之一，經修飾改造后的質粒如下圖七一1所示。PUC118上的Lacz基因編碼β半乳糖苷酶的一條多肽鏈，其表達產物與菌落顏色有關；經“修飾”后的“多克隆位點”位于LacZ基因之中。AmpR是抗氮卞青霉素基因。
1．PUC118上的基因AmpR作用的是：________“多克隆位點”中含有多種限制酶的識別序列，如HindⅢ，其切割后產生的DNA片斷中含有的部分序列是
，則限制酶HindⅢ的識別序列是________。
2．圖2示意將目的基因導入大腸桿菌的操作步驟。其中，I～V表示操作過程；A－F表示使用的相關工其，其中的E1和E2表示有關的酶。試問：E2應是________（酶）；經過E2的切割，供體染色體中的DNA片段中游離的磷酸基團總數的變化是：________。
在策略上，圖1中的“多克隆位點”包含了多種、多個識別序列，請說出設計這種“多克隆位點”的目的：________。
3．LacZ基因可以使細菌在含有X－gttl（5－溴－4－氯－3－吲哚－B－D－半乳糖）底物和IPTG（一種乳糖類似物）的培養基上形成藍色的菌落，即X－gal被lacZ基因編碼產生的鼻半乳糖昔酶水解成藍色；若要形成重組質粒，則在含X－gal的培養基上將形成白色菌落（而不是藍色的）。
請據圖2分析下列問題：
①用本無PUC118的大腸桿菌作為受體細胞，將培養瓶C中被連接處理后的DNA混合物傾入含X－gal、IPTG和________的D培養基平板上，其目的是________。
菌落生長結果圖2中所示。
②過程V進行轉移培養，則該應該挑選X、Y、Z中的________菌落進行液體培養。形成該顏色的生理原因是________。如此目的基因便被克隆了！
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