Question

【題目】將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中,可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉,其過程如下圖所示(注:農桿菌中Ti質粒上只有T-DNA片段能轉移到植物細胞中)。

(質粒中“Bt”代表“Bt基因”,“KmR”代表“卡那霉素抗性基因”)

(1)過程①需用______________酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切。為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來,應使用__________培養基。

(2)過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養,旨在讓___________________進入棉花細胞;除盡農桿菌后,還須轉接到含卡那霉素的培養基上繼續培養,目的是_______________________。

(3)若過程④僅獲得大量的根,則應在培養基中增加________________________以獲得芽;部分接種在無激素培養基上的芽也能長根,原因是_________________。

(4)檢驗轉基因棉的抗蟲性狀,常用方法是________。種植轉基因抗蟲棉能減少____的使用,以減輕環境污染。

Answer 1

【答案】限制性核酸內切 選擇 T-DNA 篩選獲得T-DNA片段的植物細胞 細胞分裂素濃度 芽頂端合成的生長素向基部運輸,促進根的分化 投放棉鈴蟲 農藥

【解析】

據圖分析，①表示構建基因表達載體，②表示將目的基因導入受體細胞（采用農桿菌轉化法）；③將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養，并脫分化形成愈傷組織；④表示再分化形成芽；⑤表示將芽培養成試管苗。

（1）過程①表示基因表達載體的構建過程，需要同種限制性核酸內切對含有Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切，然后再利用DNA連接酶構建重組質粒；篩選含重組質粒的農桿菌應該使用選擇培養基。

（2）過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養的目的是讓T-DNA進入棉花細胞；卡那霉素的作用是篩選獲得T-DNA片段的植物細胞。

（3）過程④中，在培養基中增加細胞分裂素濃度可以獲得大量的芽；同時芽頂端合成的生長素向基部運輸，也能促進根的分化。

（4）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲，若棉鈴蟲大量死亡，說明轉基因成功。種植轉基因抗蟲棉能減少農藥的使用，以減輕環境污染。