Question

31.回答有關基因工程的問題：

(1)基因工程的基本操作程序包括四個步驟。其中目的基因的獲取方法有從_____________中獲取、利用PCR技術__________、通過________________用化學方法直接人工合成；基因工程的核心是基因表達載體的構建，其目的是使目的基因在受體細胞中穩定存在，并且可以遺傳給下一代，同時使目的基因________________________；目的基因進入受體細胞并在受體細胞內維持穩定和表達的過程，稱為______________；檢查基因工程是否成功的關鍵步驟是_________________________________________。

(2)構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生黏性末端，也可能產生________________末端。若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生________________(相同、不同)黏性末端的限制酶。

(3)利用大腸桿菌生產人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，其作用是________________。在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用________________處理大腸桿菌，以利于表達載體進入；為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為________________。為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成________________，常用抗原—抗體雜交技術。

(4)將某目的基因導入植物細胞采用最多的方法是_____________________，一般先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的________________上，然后用該農桿菌感染植物細胞，并將目的基因插入植物細胞中的________________上，使目的基因的遺傳特性得以穩定維持和表達。

Answer 1

31. （每空1分，共15分。）

(1)基因文庫   擴增    DNA合成儀   能夠表達和發揮作用    

轉化  目的基因的檢測與鑒定

(2)平   相同

(3)驅動基因轉錄（出mRNA）   Ca²⁺     (DNA-RNA)分子雜交技術    蛋白質

(4)農桿菌轉化法   T—DNA     染色體的DNA