Question

【題目】PCR技術有效地解決了因為樣品中DNA含量太低而難以對樣品進行研究的問題，而被廣泛應用，此過程需要一種Taq DNA聚合酶。請回答有關問題：

（1）體內DNA復制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA，而PCR技術中應用________________。

（2）Taq DNA聚合酶是從水生耐熱細菌Taq中分離的。

①Taq DNA聚合酶的功能是_________________________________。

②Taq DNA聚合酶的化學本質為蛋白質，可用______________法和_____________法進行分離。

（3）相對于細菌分離，DNA分子的分離和提取操作要復雜的多。

①在DNA提取中兩次用到蒸餾水，其目的分別是________________________、_________________________________。

②實驗中能否以哺乳動物成熟的紅細胞為實驗材料？__________________________為什么？______________________________________________________。

（4）PCR中加入的引物有_________種，加入引物的作用是_______________________________。

Answer 1

【答案】高溫使DNA分子熱變性 催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵 凝膠色譜 電泳 使血細胞破裂，釋放出DNA分子 稀釋NaCl溶液，使DNA分子析出 不能 哺乳動物成熟的紅細胞中無核DNA分子 2 作為DNA復制的起點

【解析】

PCR技術：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；
2、原理：DNA復制；

3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物；
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）；
5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。

（1）體內DNA復制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA，而PCR技術中應用高溫使DNA分子熱變性。

（2）①Taq DNA聚合酶催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵。

②TaqDNA聚合酶的化學本質為蛋白質，可用凝膠色譜法和電泳法進行分離。

（3）①在DNA提取中兩次用到蒸餾水，第一次的目的是使血細胞吸水破裂，釋放出DNA分子、第二次是稀釋NaCl溶液，使DNA分子析出。

②實驗中不能以哺乳動物成熟的紅細胞為實驗材料，原因是哺乳動物成熟的紅細胞中無DNA分子。

（4）PCR中加入的引物有2種，加入引物的作用是分別與兩條單鏈的一端結合，作為DNA復制的起點。