Question

12．不屬于基因與載體結合的過程是（　�。�

• A． 用一定的限制酶切割質粒暴露出黏性末端
• B． 用同種限制酶切割目的基因露出黏性末端
• C． 將切下的目的基因插入到質粒的切口處
• D． 將重組的DNA導入到受體細胞中

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟（第二步），首先用一定限制酶切割質粒露出黏性末端，再用同種限制酶處理目的基因露出黏性末端，將切下的目的基因插入到質粒的切口處，最后用用DNA連接酶將目的基因和質粒連接，形成重組質粒．而將重組的DNA導入到受體細胞中進行擴增屬于下一個步驟．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關細節，能結合所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．