Question

（18分）pBR322質粒是基因工程中經常選用的工具，如圖Ⅰ所示。

I．目的基因如果插入質粒的某抗性基因中，將使該基因失活。為了檢查運載體是否導入原本無Amp^r和Tet^r的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養基上培養，得到如圖Ⅱ的菌落。再將滅菌絨布按到培養基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環素的培養基上培養，得到如圖Ⅲ的結果（空圈表示與Ⅱ對照無菌落的位置）。
（1）．pBR322質粒在基因工程中的作用是            。
（2）．下圖是pBR322質粒上被某種酶識別的一段特定序列。a處被切割后，產生的暴露出來的單鏈堿基序列是                                       。如果要從生物細胞中分離目的基因，首先需要進行基因定位，然后再用上述酶切割。將目的基因與質粒連接起來的酶作用于圖中的       處。
（3）與圖Ⅲ空圈相對應的圖Ⅱ中的菌落表現型是                             ，由此說明目的基因插入了       中。
II．下面是pBR322質粒的部分堿基序列，所編碼蛋白質的氨基酸序列為“甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—纈氨酸…”（甲硫氨酸的密碼子AUG也是起始密碼子）。

則：①、②兩單鏈作為轉錄模板鏈的是     （填序號），該鏈轉錄產生的mRNA順序是AUG                                                 ；如圖中箭頭所指堿基對G/C缺失，該基因相應片段編碼的氨基酸序列為                                      
                                                                    （ 4分）。

Answer 1

（18分，每空2分）I．（1）作為運載體        （2）． －TGCA或ACGT－     a
（3）．   能抗氨芐青霉素，但不能抗四環素     Tetr
II．② CGGGAGGCGGAUGUC…… 甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—精氨酸—甲硫氨酸…4分

解析