Question

下圖一為含有目的基因的DNA（外源DNA），圖二為某質粒，表中是幾種限制酶識別序列及其切割位點。用圖中的外源DNA與質粒構建重組質粒。

限制酶	BamHⅠ	SmaⅠ	EcoRⅠ	Hind Ⅲ
識別序列及切割位點

請根據上述信息分析回答：

55、外源DNA、質粒分別有_______、_______個游離的磷酸基團。 

56、DNA分子的一條多核苷酸鏈中，兩個脫氧核苷酸之間以_________和_________

  相連。用SmaⅠ限制酶切割外源DNA，切開的是___________和__________之

  間相連的鍵。  

57、如果用SmaⅠ酶切割外源DNA和質粒來重組質粒，其結果是_____________。

58、如果使用EcoRⅠ酶切割外源DNA和質粒，將目的基因片段與切割后的質粒混

  合，加入_________酶，獲得的環狀DNA可能有哪幾種情況？______________。

59、如果使用BamHⅠ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理外源DNA和質粒，比用EcoR

  Ⅰ酶切割的優點是_____________________。

60、將重組質粒導入大腸桿菌中，培養基中需加入___________進行鑒別和篩選含有

  ___________的細胞。

Answer 1

（12分）55. 2、0     56.磷酸    脫氧核糖    胞嘧啶脫氧核苷酸 

    鳥嘌呤脫氧核苷酸    57.目的基因與抗性基因被破壞    58.DNA連接

    原質粒切割的粘性末端重新連接；目的基因的粘性末端連接而成環狀；

    目的基因與切割質粒形成    重組質粒    59.避免切割的外源DNA、質粒

    的粘性末端自身環化     60.抗生素  重組質粒(目的基因）